直接殺傷卵巢癌細(xì)胞 

   研究顯示，eNK-EXO 攜帶 NK 細(xì)胞的典型標(biāo)志物（如 CD56、CD16）和細(xì)胞毒性蛋白（穿孔素、顆粒酶），可被卵巢癌細(xì)胞（如 SKOV3、COC1/DDP）高效攝取。與正常卵巢上皮細(xì)胞相比，癌細(xì)胞對(duì)外泌體的攝取效率更高，這使得 eNK-EXO 能精準(zhǔn)靶向癌細(xì)胞，通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和抑制增殖，發(fā)揮直接抗腫瘤作用。

   值得注意的是，相同濃度的 eNK-EXO 對(duì)正常細(xì)胞幾乎無(wú)毒性，顯示出良好的安全性。實(shí)驗(yàn)中，當(dāng) eNK-EXO 與卵巢癌細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)，癌細(xì)胞的存活率隨劑量增加而顯著下降，而正常細(xì)胞仍保持活性，這得益于外泌體對(duì)癌細(xì)胞的 “選擇性識(shí)別” 能力。

逆轉(zhuǎn)順鉑耐藥，增強(qiáng)化療效果

順鉑耐藥是卵巢癌治療的主要瓶頸，其機(jī)制包括藥物攝取減少、DNA 修復(fù)增強(qiáng)等。研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)電穿孔技術(shù)將順鉑加載到 eNK-EXO 中（eNK-EXO-DDP），發(fā)現(xiàn)其對(duì)順鉑耐藥細(xì)胞（如 COC1/DDP）的殺傷效果顯著優(yōu)于游離順鉑。

分子機(jī)制上，eNK-EXO-DDP 通過(guò)將順鉑直接遞送至癌細(xì)胞內(nèi)，繞過(guò)了耐藥細(xì)胞的藥物外排泵系統(tǒng)，同時(shí)誘導(dǎo)癌細(xì)胞周期阻滯（G2/M 期）和凋亡通路激活（如 cleaved caspase-3、PARP 蛋白表達(dá)增加）。實(shí)驗(yàn)顯示，耐藥細(xì)胞在 eNK-EXO-DDP 處理后，凋亡率提升近一倍，表明外泌體遞送系統(tǒng)有效克服了順鉑耐藥問(wèn)題。

激活腫瘤微環(huán)境中的 NK 細(xì)胞

在卵巢癌患者的腹水樣本中，NK 細(xì)胞（AS-NK）因長(zhǎng)期暴露于免疫抑制性微環(huán)境，其細(xì)胞毒性顯著降低。但 eNK-EXO 能逆轉(zhuǎn)這一抑制狀態(tài)：當(dāng) AS-NK 與 eNK-EXO 共培養(yǎng)后，其分泌穿孔素、TNF-α 等細(xì)胞毒性因子的能力明顯增強(qiáng)，對(duì)癌細(xì)胞的殺傷率恢復(fù)甚至超過(guò)未被抑制的 NK 細(xì)胞。

進(jìn)一步通過(guò) RNA 測(cè)序發(fā)現(xiàn)，eNK-EXO 處理后的 NK 細(xì)胞中，趨化因子（如 CXCL9、CXCL10、CXCL11）及其受體 CXCR3 的表達(dá)顯著上調(diào)。這些因子可促進(jìn) NK 細(xì)胞的遷移、增殖和抗腫瘤活性，相當(dāng)于為 “休眠” 的 NK 細(xì)胞注入 “激活劑”，使其重新識(shí)別并攻擊癌細(xì)胞。

    這項(xiàng)研究首次證實(shí)了 NK 細(xì)胞外泌體在卵巢癌治療中的多重潛力：不僅能直接殺傷癌細(xì)胞、遞送化療藥物逆轉(zhuǎn)耐藥，還能重塑免疫微環(huán)境，激活被抑制的 NK 細(xì)胞。這種 “三位一體” 的作用模式，為解決卵巢癌耐藥和免疫抑制兩大難題提供了新的策略。

    值得期待的是，外泌體作為 “無(wú)細(xì)胞療法”，避免了傳統(tǒng) NK 細(xì)胞治療的局限性（如細(xì)胞存活時(shí)間短、靶向性不足），具有更廣闊的應(yīng)用前景。未來(lái)，隨著技術(shù)的進(jìn)步，eNK-EXO 可能與其他療法（如 PD-1 抑制劑、靶向藥物）聯(lián)合使用，形成更精準(zhǔn)的個(gè)體化治療方案。

    當(dāng)然，從實(shí)驗(yàn)室到臨床仍需經(jīng)歷嚴(yán)謹(jǐn)?shù)陌踩院陀行则?yàn)證。但正如研究團(tuán)隊(duì)所言，這項(xiàng)工作為 NK 細(xì)胞外泌體在實(shí)體瘤治療中的應(yīng)用奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，有望推動(dòng)卵巢癌治療從 “耐藥困境” 走向 “精準(zhǔn)免疫” 的新突破。